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试管婴儿胚胎冷冻技术详细介绍

 发布:2016-10-30 15:49   来源:未知   作者:admin

在生殖医学领域中,胚胎冷冻技术应用广泛。在做试管过程中会取出很多卵子,经过精卵结合形成很多胚胎,将近一半的IVF-ET治疗周期有剩余的胚胎,如果能将这部分胚胎冻存,以后需要再次移植,就可以取出胚胎直接移植,既节省时间成本又节约费用。此外,在试管婴儿治疗中胚胎冷冻技术还可用于:

 

       1、当该周期发生严重的卵巢过度刺激综合症时,避免其进一步加重,可将胚胎冻存留待以后移植;

 

       2、胚胎移植时插管入宫腔非常困难者;

 

       3、胚胎活检后等待诊断结果或须排除供配子者HIV感染。胚胎冻存可在原核期,卵裂早期和囊胚期进行。
 

试管婴儿胚胎冷冻技术

 

  精子冷冻在不育治疗中也占很重要的部分,其作用有:

 

  1、将正常供者精液冷冻保存,建立精子库,给因无精症的不育夫妇进行供精宫腔内人工授精治疗。

 

  2、肿瘤患者在接受化疗、放疗前将精液冷存,供以后生育用。

 

  3、精神异常紧张或需出差者,在需要受精时不能提供精液,将他们任何时候射出的精液冻存作为储备。这可能会减轻精神紧张者的思想负担,在需要时可以获得精子。

 

  4、冻存少弱精精液,特别是经显微附案手术(MESA)或睾丸活检(TESE)获得的少量精子。

 

 

  冷冻技术原理

 

  利用冷冻技术将胚胎和配子从生理温度降至低温并贮存,需要时,再从低温状态解冻至生理温度。为增加胚胎和配子对冻融过程的耐受,增加存活率,必须选择合适的物质作为冷冻保护剂。

 

 

  一、常用冷冻保护剂

 

  1.渗透性保护剂   如丙二醇(PROH),二甲基亚砜(DMSO),甘油(glycerol)等小分子化学物质,容易渗透入细胞,也称为细胞内冷冻保护剂。

 

  2.非渗透性保护剂  包括单糖如葡萄糖、果糖,双糖如蔗糖、麦芽糖等,它们不能进入细胞,利用它增高细胞外溶液的渗透压而引起非特异保护作用,又称细胞外冷冻保护剂。

 

  二、冷冻保护剂对胚胎的影响及机制

 

  (1)毒性作用

 

  为证明其毒性,将胚胎置于不同的冷冻保护剂一定时间,却不将其冻融,再继续观察胚胎的发育,发现在22℃时,停留在PROH的胚胎失活率高于DM的,而在4℃时,暴露于此两种冷冻保护剂几乎未发现其对胚胎有不良影响。

 

  (2)细胞内冰晶形成

 

  细胞的冷冻实际上是一个脱水过程,如果在投入液氮前胚胎能充分脱水,避免形成细胞内冰晶,是胚胎冻融后能存活的主要因素。

 

  (3)渗透性休克

 

  冻存胚胎刚解冻时,细胞内通常所含的渗透性保护剂浓度很高,可达2000 -3000mOsm/L或更高,若将此时的细胞从冷冻管直接置于渗透压为300mOsm/L的等张盐溶液中,此时大量水分快速进入细胞而保护剂却不能立即渗出即引起细胞急剧肿胀甚至破裂,这种现象称为渗透性休克。胚胎明显地不能耐受如此大而突然的跨膜渗透压差。容积变化的速度和变化时的温度较容积变化的大小对合子的发育更重要。

 

 

  (4)解冻过程冰晶重新形成

 

  解冻太快或太慢都会损伤胚胎。解冻太快易发生透明带破坏,所以从液氨中取出冷冻管后需要先在空中停留一定时间。但是如果解冻太慢,就会形成细胞内冰晶,快慢之间的合适速度的界线很窄,细胞内冰晶重新形成开始于-85℃到-70℃,所以把冷冻管在空气中摇动一定时间,当其温度接近-80℃时,就要立即换成更快速升温法,即将冻管置30℃水中。

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